China aprova Albuvirtide: primeiro medicamento anti-HIV injetável de ação prolongada desenvolvido internamente

PTI Jun 06, 2018 15:58:40 IST

Pequim: A China aprovou o primeiro medicamento de HIV injetável de ação prolongada, desenvolvido internamente, o Albuvirtide, que pode ser um benefício para dezenas de milhares de pacientes com HIV / AIDS no país, informou a mídia oficial. A droga, aprovada pelo Food and Drug Administration da China, pode bloquear a fusão do vírus e das membranas das células hospedeiras, interrompendo o ciclo de vida do HIV em seu estágio inicial, segundo o jornal estatal Global Times , do " Science and Technology Daily" .

Albuvirtide é injetado uma vez por semana e é seguro, disse um funcionário da Frontier Biotechnologies, de Nanjing, de sobrenome Zhu, ao Global Times . Em comparação com medicamentos anti-HIV importados, Albuvirtide tem menos efeitos colaterais, especialmente no fígado, informou a agência de notícias estatal Xinhua , citando Wu Hao, chefe do centro de infecção do Hospital You'an de Pequim. A droga é um inibidor de fusão que deve ser usado com medicamentos anti-retrovirais para tratar pessoas com HIV que receberam terapia antiviral, disse a empresa.

Albuvirtide poderia potencialmente melhorar a adesão do paciente, melhorar a qualidade de vida e reduzir os custos de tratamento para pacientes infectados pelo HIV, escreveu. Os atuais tratamentos para HIV usados ​​na China são genéricos ou importados. Pacientes com AIDS e HIV tomavam um punhado de comprimidos todos os dias, disse Peng Xiaohui, sexólogo da Central China Normal University, ao Global Times . Peng acrescentou que os pacientes têm que superar os obstáculos psicológicos primeiro, já que precisam injetar o remédio por conta própria ou fazer com que o médico o faça por eles.

"Primeira droga a nível nacional desenvolvida da China oferece novas pacientes com HIV uma nova opção de tratamento. Esperamos para dissipar o fato de que a China não tem desenvolvido um bom remédio anti-Aids", Xie Dong, cientista-chefe e ex-chefe da Frontier Biotechnologies Inc foi citado pela Ciência e Technology Daily como dizendo.

Várias empresas estão desenvolvendo drogas contra a AIDS de longa duração na China, mas apenas a droga da Frontier foi aprovada, segundo o relatório da Xinhua .

Segundo dados oficiais, a China tem 718.270 pessoas que sofrem de HIV / AIDS na China. Até o final de junho do ano passado, 221.628 pessoas haviam morrido de doenças relacionadas à AIDS na China, de acordo com um relatório da Xinhua de dezembro de 2017.


https://www.firstpost.com/world/china-approves-albuviritide-first-domestically-developed-long-acting-injectable-anti-hiv-drug-4498961.html

CB

Vacina anti-HIV em animais induz anticorpos que neutralizam dezenas de cepas de HIV

Segunda-feira, 4 de junho de 2018

Os resultados do estudo do NIH representam um grande avanço para o desenho de vacinas contra o HIV baseado em estrutura

Um regime experimental de vacinas baseado na estrutura de um local vulnerável no HIV induziu anticorpos em camundongos, porquinhos-da-índia e macacos que neutralizaram dezenas de cepas de HIV de todo o mundo. Os resultados foram relatados hoje na revista Nature Medicine por pesquisadores do Instituto Nacional de Alergia e Doenças Infecciosas (NIAID), parte do National Institutes of Health, e seus colegas.

Peter D. Kwong, Ph.D., e John R. Mascola, MD, lideraram o estudo. O Dr. Kwong é chefe da Seção de Biologia Estrutural do NIAID Vaccine Research Center, e o Dr. Mascola é o diretor do centro.

“Os cientistas do NIH usaram seu conhecimento detalhado da estrutura do HIV para encontrar um local incomum de vulnerabilidade ao vírus e projetar uma vacina nova e potencialmente poderosa”, disse Anthony S. Fauci, diretor do NIAID. “Este estudo elegante é potencialmente importante. passo em frente na busca contínua de desenvolver uma vacina segura e eficaz contra o HIV ”.

Um teste humano preliminar do novo regime de vacinação está previsto para começar no segundo semestre de 2019.

O relatório de hoje reflete uma das duas abordagens complementares amplas que o NIAID está buscando para desenvolver uma vacina contra o HIV. Em uma abordagem, os cientistas primeiro identificam anticorpos potentes contra o HIV que podem neutralizar muitas cepas do vírus, e então tentam extrair esses anticorpos com uma vacina baseada na estrutura da proteína de superfície do HIV onde os anticorpos se ligam. Em outras palavras, os cientistas começam com a parte mais promissora da resposta imune e trabalham para desenvolver uma vacina que a induza. Este método foi usado para projetar a vacina descrita hoje.

A outra abordagem empírica para o desenvolvimento de vacinas contra o HIV começa avaliando as vacinas candidatas mais encorajadoras para a eficácia em pessoas através de ensaios clínicos. Em seguida, os cientistas tentam basear-se nos resultados dos ensaios bem-sucedidos, examinando, por exemplo, amostras de sangue e outras amostras clínicas dos participantes do estudo que receberam a vacina para identificar as partes mais promissoras da resposta imune. Posteriormente, os pesquisadores usam essa informação para melhorar as abordagens de vacinação para estudos futuros. Este método foi utilizado para desenvolver o regime de vacinação contra o HIV testado no ensaio clínico RV144 e os regimes de vacina contra o HIV atualmente em estudo nos ensaios clínicos HVTN 702 e Imbokodo .

Nos últimos anos, pesquisadores do HIV descobriram muitos anticorpos naturais que podem impedir que múltiplas cepas de HIV infectem células humanas em laboratório. Cerca de metade das pessoas que vivem com o HIV produzem os chamados anticorpos “amplamente neutralizantes” (link is external), mas geralmente apenas após vários anos de infecção - muito tempo depois de o vírus ter estabelecido uma posição no corpo. Os cientistas identificaram e caracterizaram os sítios, ou epítopos, do HIV, onde cada anticorpo amplamente conhecido neutralizante se liga. Muitos laboratórios em todo o mundo estão desenvolvendo candidatos à vacina contra o HIV com base na estrutura desses epitopos com o objetivo de persuadir o sistema imunológico de pessoas HIV-negativas a produzir anticorpos protetores após a vacinação.

A vacina experimental descrita no relatório de hoje é baseada em um epitopo chamado peptídeo de fusão do HIV, identificado pelos cientistas do NIAID em 2016 . O peptídeo de fusão, uma cadeia curta de aminoácidos, faz parte do pico na superfície do HIV que o vírus usa para entrar nas células humanas. De acordo com os cientistas, o epítopo do peptídeo de fusão é particularmente promissor para uso como vacina porque sua estrutura é a mesma na maioria das cepas do HIV, e porque o sistema imunológico claramente “vê” e faz uma forte resposta imunológica a ele. O peptídeo de fusão não possui açúcares que obscurecem a visão do sistema imunológico de outros epitopos do HIV.  

Para fazer a vacina, os pesquisadores projetaram muitos imunógenos diferentes - proteínas projetadas para ativar uma resposta imune. Estes foram concebidos utilizando a estrutura conhecida do péptido de fusão. Os cientistas primeiro avaliaram os imunogénios utilizando uma colecção de anticorpos que têm como alvo o epítopo do péptido de fusão e depois testaram em ratinhos quais os imunogénios que provocaram mais eficazmente anticorpos neutralizantes do HIV ao péptido de fusão. O melhor imunogênio consistia em oito aminoacidos do peptídeo de fusão ligados a um transportador que provocava uma forte resposta imunitária. Para melhorar seus resultados, os cientistas associaram esse imunógeno a uma réplica do pico do HIV.

Os pesquisadores então testaram diferentes combinações de injeções da proteína mais o pico de HIV em camundongos e analisaram os anticorpos gerados pelos esquemas vacinais. Os anticorpos ligados ao péptido de fusão do HIV e neutralizaram até 31 por cento dos vírus de um painel globalmente representativo de 208 estirpes de HIV.

Com base em suas análises, os cientistas ajustaram o regime vacinal e testaram-no em porquinhos-da-índia e macacos. Esses testes também produziram anticorpos que neutralizaram uma fração substancial de cepas de HIV, fornecendo evidências iniciais de que o regime de vacinas pode funcionar em várias espécies. 

Os cientistas agora estão trabalhando para melhorar o regime vacinal, incluindo torná-lo mais potente e capaz de alcançar resultados mais consistentes com menos injeções. Os pesquisadores também estão isolando anticorpos adicionais amplamente neutralizantes gerados pela vacina em macacos, e eles vão avaliar esses anticorpos por sua capacidade de proteger os animais de uma versão de macaco do HIV. Os cientistas do NIAID usarão suas descobertas para otimizar a vacina e fabricarão uma versão adequada para testes de segurança em voluntários humanos em um ensaio clínico cuidadosamente planejado e monitorado.

https://www.nih.gov/news-events/news-releases/hiv-vaccine-elicits-antibodies-animals-neutralize-dozens-hiv-strains

CB

CRISPR erradica o HIV-1 latente, oferecendo esperança de "curas funcionais"

21 de maio de 2018

Cientistas do Japão usaram a tecnologia CRISPR-Cas9 para impedir a replicação do vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (HIV-1) em células T latentemente infectadas que não podem ser controladas usando os tratamentos com medicamentos existentes. A abordagem de edição de genes efetivamente perturba dois genes reguladores do HIV-1, tat e rev , que são essenciais para a replicação viral. Descrevendo seus estudos in vitro em Scientific Reports , os pesquisadores da Escola de Medicina da Universidade de Kobe e da Escola de Ciências da Saúde da Universidade de Kobe dizem que os resultados iniciais indicam que o uso de CRISPR-Cas9 para direcionar genes reguladores do HIV-1 pode oferecer uma nova abordagem. curas funcionais ”.

"Estes resultados mostram que o sistema CRISPR-Cas9, visando os genes reguladores do HIV-1, tat e rev , é um método promissor para tratar a infecção pelo HIV", comenta o co-autor Masanori Kameoka, Ph.D., professor associado. na Escola de Pós-Graduação em Ciências da Saúde da Universidade de Kobe. "Agora precisamos investigar como podemos seletivamente introduzir um sistema CRISPR-Cas9 que atinja genes do HIV-1 nas células infectadas de pacientes."

O artigo publicado pela equipe, em co-autoria do Dr. Kameoka, e os pesquisadores Youdiil Ophinni, Mari Inoue, Ph.D., e Tomohiro Kotaki, Ph.D., intitulam-se “ Sistema CRISPR / Cas9 Targeting Genes Regulatórios do HIV-1 Inibem a Replicação Viral em Culturas de Células T Infectadas ”.

O HIV-1 infecta cerca de 35 milhões de pessoas em todo o mundo e, embora a terapia antirretroviral (ART) vitalícia possa ajudar a converter uma infecção mortal em uma “doença crônica mais manejável”, os tratamentos atuais não são uma cura porque não podem erradicar completamente a doença. vírus, que insere seus genes no DNA das células do hospedeiro, explicam os autores. Apesar do tratamento usando ART, o HIV-1 continua a se replicar em um nível muito baixo em alguns tipos celulares do sistema imunológico infectados de forma latente, como células CD4 + , macrófagos e células dendríticas foliculares. "Os atuais compostos antivirais são incapazes de atacar o genoma proviral integrado dentro desses reservatórios celulares e a recuperação viral rápida ocorre após a interrupção da TAR", explicam. O vírus também pode se esconder em tecidos como o sistema nervoso central.

As células T CD4 + têm sido as mais estudadas dos reservatórios celulares nos quais o HIV-1 pode persistir. Uma pequena fração de células CD4 + em repouso abrigará o HIV-1, mesmo durante a TAR, e é considerada “o principal obstáculo à erradicação do HIV-1”, destacam os autores. “A infecção latente pelo HIV-1 nas células T CD4 + em repouso é a principal causa da barreira à cura funcional.” Eles sugerem que uma “intervenção única para limpar a persistência genômica viral representa uma abordagem sensata e promissora para alcançar uma cura funcional.

Uma abordagem potencial para erradicar o HIV-1 de tais reservatórios é interromper diretamente o genoma proviral usando ferramentas de edição do genoma. Infelizmente, tecnologias como a nuclease do dedo de zinco (ZFN) e a nuclease efectora do tipo ativador de transcrição (TALEN) mostraram-se problemáticas devido a “dificuldades associadas ao projeto, síntese e validação de proteínas para um locus genético específico de interesse”.

A equipe da Escola de Pós-Graduação da Universidade de Kobe desenvolveu uma abordagem alternativa usando a edição do gene CRISPR-Cas9 para romper dois genes virais reguladores, tat e rev, que são essenciais para a replicação viral e que também são altamente conservados em diferentes subtipos de HIV-1.

Os cientistas gerado seis ARNs de guia (gRNAs) -três segmentação tat e três segmentação Rev- para dirigir a enzima cas9 de clivagem de ADN para os sítios relevantes no DNA proviral. Eles empacotaram gRNAs e o sistema de enzima Cas9 em um vetor lentiviral, que eles poderiam então introduzir em células cultivadas.

Estudos iniciais demonstraram que o vetor efetivamente aboliu a expressão de tat e rev em células cultivadas que foram projetadas para expressar os genes. Os genes-alvo foram mutados nos locais de clivagem Cas9 com “alta frequência e várias mutações de indel [inserção / deleção]”, escrevem os autores. Encorajadoramente, a transdução de CRISPR-Cas9 de células T humanas não teve efeito na viabilidade celular, e não houve mutações detectáveis ​​fora do alvo no ADN humano.

As construções CRISPR também direcionaram a expressão de tat e rev em células T CD4 + infectadas de forma latente , “provando que a entrega lentiviral do sistema CRISPR / Cas9 alcançou e clivou com sucesso o genoma proviral dormente do HIV-1”, afirmam. As construções também suprimiram marcadamente a reativação do HIV-1 dependente de citocinas em células infectadas de forma latente e inibiram a replicação viral em células persistentemente infectadas. A equipe diz que esses resultados "demonstraram que a entrega lentiviral de CRISPR / Cas9 alcançou com sucesso o genoma proviral isolado, genes reguladores clivados e inibiu significativamente a replicação viral, mesmo após a reversão da latência".

Eles alegam que a capacidade de transduzir células não-divididas, como células T CD4 + em repouso , usando construções lentivirais e alcançar a expressão do transgene Cas9 a longo prazo, apóia a viabilidade de usar o sistema para erradicar células que agem como reservatórios latentes do HIV-1.

Eles reconhecem que mais pesquisas serão necessárias para traduzir seu trabalho in vitro em  modelos pré-clínicos in vivo e pacientes humanos. “Para introduzir com segurança e eficácia o sistema CRISPR-Cas9, os vetores devem ser melhorados”, observa o Dr. Kameoka. "Esperamos que esta pesquisa nos forneça informações úteis no desenvolvimento de um método de tratamento que possa curar completamente a infecção pelo HIV-1."

“A capacidade dos vetores lentivirais de transduzir células não divididas, incluindo células T CD4 + emrepouso , e manter a expressão do transgene Cas9 estável a longo prazo, sustenta seu uso potencial na erradicação de células infectadas que constituem o reservatório latente”, concluem os pesquisadores. "Com base nos rápidos avanços que estão sendo alcançados na pesquisa CRISPR / Cas9, uma cura funcional do HIV-1 pode em breve estar ao nosso alcance."

https://www.genengnews.com/gen-news-highlights/crispr-eradicates-latent-hiv-1-offering-hope-of-functional-cures/81255839

CB

A terapia de ciclo curto (TCT) alcançou a supressão virológica sustentável em jovens

Bradley van Paridon

 22,de maio de 2018

A terapia de ciclo curto (TCT), compreendendo um regime de terapia antiretroviral (TAR) de 5 dias e 2 dias alcançou a não inferioridade sustentável da supressão virológica em jovens com HIV em comparação com a terapia contínua (TC) em uma média de 3,6 anos, segundo pesquisa publicada. em PLoS One .

Participantes com idade entre 8 e 24 anos com supressão virológica recebendo uma ART de primeira linha baseada em efavirenz (EFV) foram incluídos no ensaio aberto de não inferioridade (BREATHER; ClinicalTrials.gov identificador: NCT01641016 ). Eles foram aleatoriamente designados 1: 1, estratificados por idade e locais não africanos / africanos, para continuar recebendo CT ou mudar para SCT. Os resultados indicaram que o TCT foi não inferior à TC após 48 semanas, e os resultados do seguimento prolongado, uma mediana de 185,3 semanas, foram relatados aqui.

Os participantes que consentiram com o seguimento prolongado totalizaram 99 para SCT e 100 para CT. Do total de 199 participantes, 53% eram meninos com uma mediana de idade basal de 14 anos (intervalo interquartil [IQR], 12-18 anos) e contagem mediana de CD4 735 células / μL (IQR, 576-968 células / μL). No final do seguimento prolongado, 16 participantes em cada grupo tinham confirmado carga viral ≥50 cópias / mL (hazard ratio [HR], 1,00; IC 95%, 0,50-2,00). A diferença estimada em porcentagem com o rebote viral (SCT menos CT) na semana 144 foi de 1,9% (IC de 90%, -6,6% para 10,4%; P =, 72) e foi semelhante em uma análise por protocolo.

Não houve diferenças significativas nas proporções de participantes com eventos adversos grau 3/4 (18 SCT vs 16 participantes CT; P = 0,71) ou eventos adversos relacionados com a ART (10 vs 12, P = 0,82) foram observados entre os grupos. Poucos eventos adversos relacionados à TARV foram observados no grupo TE nas primeiras 48 semanas, mas isso não foi mantido durante o seguimento prolongado.

O estudo, no entanto, não foi desenvolvido para mostrar diferenças sutis nos perfis de toxicidade. Mais participantes do grupo SCT tiveram pelo menos um evento adverso grave, que não se assemelhou aos resultados em ensaios com adultos em que eventos adversos graves foram semelhantes entre os grupos SCT e CT. Isso pode ser atribuído à falta de cegamento, o que pode ter levado a um aumento das tendências para que os participantes do SCT sejam admitidos no hospital. Evidências disso foram vistas quando o Comitê de Revisão de Endereços cegado considerou que mais da metade dos eventos adversos sérios foram resultado de causas não relacionadas ao HIV.

Os investigadores concluíram que o tratamento baseado na EFV de dose padrão com 2 dias de folga por semana é adequado para jovens infectados com HIV-1 aderentes, que são virologicamente reprimidos. Esta opção pode aliviar a fadiga do tratamento, melhorar o estilo de vida e reduzir a toxicidade cumulativa dos anti-retrovirais durante a vida do paciente, além de economizar custos. Além disso, foi recomendado que essa opção fosse usada quando os pacientes fossem submetidos ao monitoramento de carga viral a cada três meses.

O trabalho futuro deve concentrar-se na generalização do SCT para outros regimes de TARV e nos esquemas de monitorização menos frequentes.            

Referência

Turkova A, Moore CL, Butler K, et al; BREATHER (PENTA 16) grupo experimental. Terapêutica antirretroviral baseada no efavirenze aos fins-de-semana em crianças, adolescentes e adultos jovens infectados por VIH (BREATHER): resultados de seguimento alargados de um ensaio aleatorizado, aberto, de não inferioridade . PLoS One . 2018; 13 (4): e0196239.

CB

Descoberta abre as portas para novas terapias

LANÇAMENTO PÚBLICO: 10 DE MAIO DE 2018

San Francisco, CA - 10 de maio de 2018 - Uma célula-tronco é uma com infinitas possibilidades. Assim, por décadas, os cientistas têm intrigado sobre como a célula escolhe continuar sendo uma célula-tronco e continuar se dividindo, ou se especializar em um tipo específico de célula, como um coração ou célula cerebral.

O mesmo tipo de decisão é tomada pelo HIV. Quando o vírus infecta uma célula, ele pode ligar e começar a multiplicar ou desativar para que ele possa se esconder na célula até uma data posterior.

"A biologia pode proteger suas apostas de maneira semelhante a como você pode diversificar os investimentos financeiros", explicou Leor S. Weinberger, PhD, professor e diretor do Centro para Circuitos de Células dos Institutos Gladstone, William and Ute Bowes. "Diversificar os investimentos colocando alguns fundos em ações de alto risco e alto rendimento e em contas de poupança de baixo risco e baixo rendimento ajuda a proteger contra a volatilidade no mercado. Da mesma forma, o HIV cobre suas bases em um ambiente volátil, gerando ativos e infecções dormentes ".

Mas se o HIV está alternando aleatoriamente entre esses dois destinos, como se compromete a permanecer em um estado? O laboratório de Weinberger já respondeu a essa longa pergunta e descobriu, potencialmente, como os sistemas biológicos tomam essas decisões. Suas descobertas são publicadas hoje na proeminente revista científica Cell .

O HIV se beneficia da manutenção tanto de um estado ativo quanto de um estado latente.

O estado ativo permite que o vírus se espalhe e infecte mais células, enquanto o vírus no estado latente pode sobreviver oculto por longos períodos de tempo. Enquanto o vírus ativo pode ser morto por medicamentos antivirais, o vírus latente está à espera e pode reativar rapidamente quando as drogas são interrompidas. Como o vírus latente não pode ser tratado pelas terapias atuais, ele representa o principal obstáculo para a cura do HIV.

A equipe de Weinberger mostrou anteriormente que o HIV gera essas duas categorias de infecção, explorando as flutuações aleatórias na expressão gênica.

"Mesmo quando duas células são geneticamente idênticas, pode-se produzir uma grande quantidade de proteína, enquanto a outra pode produzir uma quantidade muito menor", disse Maike Hansen, pesquisador de pós-doutorado no laboratório de Weinberger e um dos primeiros autores do estudo. "Essas flutuações aleatórias, chamadas de ruído, podem determinar o destino e a função da célula. O HIV usa o ruído para criar vírus ativos e latentes."

Para expressar seus genes, o HIV usa um mecanismo conhecido como splicing alternativo, que essencialmente permite que o vírus corte partes de seu genoma e as organize em diferentes combinações. Observando células individuais ao longo do tempo, os pesquisadores descobriram que o HIV seqüestra uma forma exótica de emenda para sintonizar ruídos aleatórios. Este ajuste de ruído determina se o vírus permanecerá estável ou latente.

"Descobrimos que o HIV usa uma forma particularmente ineficiente de splicing para controlar o ruído", acrescentou Hansen. "Surpreendentemente, se funcionasse eficientemente, esse mecanismo produziria um vírus muito menos ativo. Mas, ao aparentemente desperdiçar energia por meio de um processo ineficiente, o HIV pode realmente controlar melhor sua decisão de permanecer ativo."

A equipe de Weinberger usou uma combinação de modelagem matemática, imagem e genética para mostrar que esse tipo de splicing alternativo ocorre após a transcrição, durante a qual a informação genética no DNA é copiada para uma molécula chamada RNA. Anteriormente, os cientistas pensavam que o splicing ocorria ao mesmo tempo que a transcrição. Este estudo representa a primeira função para splicing pós-transcricional.

Metas não exploradas para estratégias de cura do HIV

O estudo demonstra que o HIV conservou um processo altamente ineficiente de propósito e, ao corrigi-lo, os cientistas poderiam prejudicar significativamente o vírus. Essas descobertas podem revelar alvos inexplorados para o desenvolvimento de novas estratégias de cura para o HIV.

"O circuito de emenda pode nos dar uma oportunidade de atacar terapeuticamente o vírus de uma maneira diferente", disse Weinberger, que também é professor de química farmacêutica na UC San Francisco. "Por um tempo, houve propostas para 'travar' o HIV na latência e 'bloqueá-lo' da reativação, mas como fazer isso não ficou claro."

Os pesquisadores podem agora ser capazes de continuamente forçar o HIV de volta à latência, explorando o circuito de splicing do vírus e conseguindo a terapia de "bloqueio e bloqueio".

Ao revelar um novo mecanismo fundamental, este estudo também tem implicações mais amplas na biologia. A emenda ineficiente provavelmente ocorre em 10 a 20% dos genes. Assim, este circuito pode ser geralmente empregado para minimizar flutuações aleatórias na expressão gênica e poderia explicar como outras decisões biológicas são estabilizadas.

https://www.eurekalert.org/pub_releases/2018-05/gi-doh051018.php

CB

Edição de genes promete diminuir o "reservatório" de HIV

Estudo que imita a mutação resistente ao HIV de Timothy Ray Brown levou a menos células infectadas latentemente - um passo fundamental para conduzir o vírus à remissão sem a necessidade de antivirais

25 de abril de 2018

 

Por Mary Engel / Fred Hutch News Service

Ao transplantar células-tronco sanguíneas que haviam sido editadas para resistir à infecção pelo HIV, cientistas do Centro de Pesquisa do Câncer Fred Hutchinson conseguiram reduzir o tamanho de "reservatórios" inativos em animais infectados, segundo resultados de pesquisas publicados na revista PLOS Pathogens . Reduzir ou eliminar esses reservatórios persistentes é um passo fundamental para curar o HIV ou, para usar um termo emprestado do câncer , levar o vírus à remissão para que os medicamentos antirretrovirais diários não sejam necessários.
"O número de células infectadas de forma latente, que chamamos de reservatório viral, foi reduzido", disse o principal autor Dr. Chris Peterson, cientista do laboratório de transplante de células-tronco e especialista em terapia genética Dr. Hans-Peter Kiem . autor sênior. “Pegamos amostras de diferentes tecidos e medimos o RNA e o DNA do vírus. Ambos foram significativamente menores em animais transplantados em relação aos controles ”.
As células editadas constituíram cerca de 4 por cento do total de glóbulos brancos do sangue - ainda não o suficiente para induzir a remissão, disse Peterson. O próximo passo será ajustar as técnicas de edição de modo que mais células do gene "tomem", ou enxerguem, e multipliquem após o transplante, aumentando a porcentagem e indo mais longe no reservatório.

Encolher o reservatório é fundamental, porque o HIV se integra ao DNA de algumas das células mais duradouras do corpo, onde entra em estado de dormência, mas pode acordar a qualquer momento e produzir novos vírus. Inicialmente, os cientistas pensavam que os coquetéis de medicamentos anti-retrovirais, que em 1996 transformaram o HIV de uma sentença de morte para uma doença crônica, curariam o HIV se fossem tomados por tempo suficiente. Mas acontece que as drogas sozinhas não podem limpar os reservatórios. Parar a medicação diária permite que o HIV rugir de volta em menos de duas semanas.

Um punhado de outras equipes de pesquisa publicou resultados mostrando algumas reduções de reservatórios em estudos com animais: o Dr. Louis Picker e colegas do Vaccine and Gene Therapy Institute da Oregon Health & Science University, usando uma vacina; Dr. Dan Barouch e sua equipe no Centro de Virologia e Pesquisa de Vacinas do Beth Israel Deaconess Medical Center-Harvard Medical School, usando uma droga que "chuta" as células do sono acordadas combinadas com um poderoso anticorpo; e o Dr. Mirko Paiardini e colegas da Universidade Emory, que reduziram a inflamação prejudicial como um meio de permitir que o sistema imunológico combata melhor o vírus.

Peterson usou uma técnica de edição de genes chamada nucleases do dedo de zinco, ou ZFNs, para interromper um receptor usado como um portal pela maioria das formas de HIV (ou, neste e em outros estudos animais, um híbrido de HIV e sua versão símia, chamada SHIV ). As células-tronco modificadas foram então devolvidas para repovoar o sistema imunológico no que é conhecido como um transplante autólogo, o que significa usar células-tronco do próprio paciente em vez de doador.

Anteriormente, ele havia mostrado que as células edificadas por transplante autólogo eram seguras e se multiplicariam em animais saudáveis ​​e não infectados, uma descoberta pela qual ele foi agraciado com o Prêmio Jovem Investigador do Prêmio Especial de Cura do HIVem 2015 da Sociedade Internacional de AIDS e Agência Nacional Francesa para Pesquisa em Aids.

O projeto: Timothy Ray Brown

O trabalho de Peterson faz parte da derrota HIV baseada em Hutch , um consórcio liderado por Kiem e virologista Dr. Keith Jerome que foi financiado pela primeira vez em 2011 pelos Institutos Nacionais de Saúde como um dos três grupos de pesquisa público-privado que investigam diferentes estratégias de cura do HIV. ( Financiado novamente em 2016 , é agora um de seis desses grupos.) Em sua primeira rodada de financiamento, a derrota HIV focou no transplante autólogo usando células-tronco geneticamente modificadas como uma maneira mais segura e escalável de curar o HIV com base no único caso conhecido de Cura pelo HIV até hoje: a de Timothy Ray Brown .

O caso de Brown, primeiro amplamente divulgado em 2009, estimulou a pesquisa de cura pelo HIV. Ele havia recebido um transplante de medula óssea alogênico - usando células doadoras combinadas - em 2007 para tratar leucemia com risco de vida. Como Brown também tinha HIV, seu médico em Berlim , onde ele morava na época, procurou um doador com duas cópias de uma mutação no gene CCR5, que resulta em resistência natural ao HIV. Esta é a mutação que Peterson imitou usando ZFNs.

 Em 2008, o câncer de Brown voltou e ele precisou de um segundo transplante. Mas ele parou de tomar remédios anti-retrovirais para o HIV depois do primeiro transplante, e os cientistas não detectaram o vírus desde então . (Sua leucemia também permanece em remissão.)

Um transplante de medula óssea de alto risco - Brown quase não sobreviveu ao segundo - não é uma maneira de tentar curar a grande maioria das pessoas com HIV que também não enfrentam um câncer mortal no sangue. Mas até o caso de Brown, ninguém acreditava que o HIV pudesse ser curado por causa daqueles reservatórios de células infectadas de forma latente.

Os pesquisadores têm certeza de que as células resistentes ao HIV do doador desempenham um papel na cura de Brown; Em pelo menos dois casos , pessoas com câncer e HIV que se submeteram a transplantes sem doadores resistentes ao HIV recaíram após ficarem sem HIV por meses. Mas eles têm menos certeza sobre o papel desempenhado pelo resto do processo de transplante. E quanto ao “condicionamento” intensivo pré-transplante de Brown - um regime de quimioterapia e radiação que destrói o sistema imunológico para dar lugar a células transplantadas - ou a doença do enxerto contra o hospedeiro que ele desenvolveu após o segundo transplante?

"Mesmo para um paciente com câncer, ele passou por um tratamento extraordinariamente intensivo, com dois transplantes e a quimioterapia", disse Peterson. "Ele passou por muita coisa."

O objetivo da derrotaHIV é não colocar ninguém que seja saudável através de um tratamento tão duro, que o próprio Brown endossa completamente. Assim, embora seja necessário algum condicionamento para criar espaço para o crescimento de novas células-tronco, a Peterson está usando uma versão muito menos severa. Além disso, o transplante autólogo evita a doença letal potencialmente enxerto-hospedeiro que pode surgir quando um sistema imunológico doador vê e ataca seu novo hospedeiro como sendo estrangeiro.

Ao mesmo tempo, também perde um potencial efeito de enxerto-versus-reservatório, semelhante ao efeito enxerto-versus-leucemia que os pesquisadores aprenderam é parte da cura da leucemia. (Isto é, as células do sistema imunológico do doador atacam e matam as células de leucemia perdidas pela quimioterapia ou radiação.) Por essa razão, Peterson e outros pesquisadores acreditam que um segundo passo pode ser necessário para além de tornar as células-tronco resistentes ao HIV.

Próximos passos

Em um estudo publicado em dezembro, também  no PLOS Pathogens , Peterson e colaboradores da Universidade da Califórnia, Los Angeles, modificaram células-tronco adicionando um receptor de antígeno quimérico, ou CAR, programado para matar células infectadas pelo HIV, um processo semelhante a um tipo. da terapia gênica que está sendo testada contra o câncer .  

A maioria das terapias contra o câncer ainda experimentais reprograma geneticamente as células T de um paciente - um tipo de célula imune que procura e destrói células anormais ou infectadas. Os pesquisadores de cura para o HIV Fred Hutch estão trabalhando para reprogramar as células-tronco, que dão origem às células T.

Por que células-tronco?

"Longa história curta: Eles vão persistir para toda a vida do indivíduo", disse Peterson. No estudo anterior do CAR publicado em dezembro, os pesquisadores notaram que as células-tronco pareciam produzir células T anti-HIV quando necessário.

"O interessante é que podemos ver que as células do CAR vêm e vão enquanto o vírus vem e vai", disse ele. “Quando colocamos os animais em terapia antirretroviral, as células do CAR diminuem. Quando os tiramos, eles voltam. Eles agem como sentinelas, indo dormir e acordando de volta quando necessário. ”

Idealmente, o tratamento combinaria as modificações do gene CCR5 e CAR - casando uma defesa contra a infecção pelo HIV com uma ofensa contra células já infectadas.

“Acreditamos que, ao permitir que uma célula com edição CCR5 e resistente a infecções também procure células infectadas usando uma molécula de CAR, podemos melhorar ainda mais a capacidade de reduzir ou eliminar reservatórios”, disse Peterson. "Seria mais uma abordagem ativa do que uma abordagem passiva".

Peterson e seus colegas, juntamente com colaboradores da UCLA, continuam a aperfeiçoar técnicas para aumentar a proporção de células editadas por genes, bem como planejar um estudo combinando a mutação protetora do CCR5 com um CAR para ofender.

Enquanto isso, o Centro Médico da Cidade da Esperança, na Califórnia, e o membro do HIV, Sangamo Therapeutics, abriram um pequeno ensaio clínico humano testando um transplante autólogo CCR5, que é semelhante aos estudos em animais de Peterson, mas usa um regime de condicionamento diferente.

"Estamos animados para ver onde eles vão", disse Peterson.

https://www.fredhutch.org/en/news/center-news/2018/04/gene-editing-shrinks-hiv-reservoir.html

CB